久久久久久久久久久精品尤物_久久亚洲伊人中字综合精品_亚洲伊人久久大香线蕉综合图片_手机看片久久国产免费

產品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術與支持 > 詳述ELISA定性測定判斷方法
詳述ELISA定性測定判斷方法
點擊次數:1626 更新時間:2022-10-05

      ELISA定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出 "有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來表示反應的強度,其實質仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應的稀釋度即為滴度。根據滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性具定量意義。在間接法和夾心法 ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反應的結果判斷方法不同,分述于下。

1、  間接法和夾心法

這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在 ELSIA中,正常人血清反應后常可出現呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時,宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。

a. 陽性判定值

陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。

用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現舉某種檢測 HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng /ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NC X )和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:

陽性判定值=NCX+0.05

標本 A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數,只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。

根據以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用,試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的后果。

b. 標本/陰性對照比值

在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本( S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規,如N<0.05(或其他數值),則按0.05計算,否則將出現假陽性結果。

2、 競爭法

在競爭法 ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應為敏感。

競爭法 ELISA不易用自視判斷結果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。

a. 陽性判定值法

與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,但在計算公式中引入陽性對照 A值,現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±1 00u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NC X )和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(N-P)必須大于一個特定的數值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:

陽性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX

標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。

b. 抑制率法

抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,按下式計算:

抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×/陰性對照A值

一般規定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。


久久久久久久久久久精品尤物_久久亚洲伊人中字综合精品_亚洲伊人久久大香线蕉综合图片_手机看片久久国产免费
  • <code id="ywcog"><tr id="ywcog"></tr></code>
  • <rt id="ywcog"></rt>
    
    
    <dl id="ywcog"><acronym id="ywcog"></acronym></dl>
    <rt id="ywcog"><acronym id="ywcog"></acronym></rt>
    <li id="ywcog"></li>
  • 一本色道久久综合精品竹菊| 欧美日韩国产经典色站一区二区三区 | 国产酒店精品激情| 国产日韩精品视频一区| a4yy欧美一区二区三区| 一区二区三区四区不卡在线| 欧美三级韩国三级日本一级| 日韩专区一卡二卡| 久久综合av免费| 成人国产电影网| 一区二区三区在线观看视频| 777色狠狠一区二区三区| 久久成人久久爱| 中文字幕制服丝袜成人av | 一区二区三区中文字幕在线观看| 欧美日韩一区不卡| 精品综合免费视频观看| 国产精品传媒入口麻豆| 欧美日韩性生活| 激情综合色播五月| 综合自拍亚洲综合图不卡区| 欧美精品在线一区二区三区| 精品制服美女丁香| 亚洲图片激情小说| 日韩一区二区三区视频在线 | 欧美猛男超大videosgay| 国内国产精品久久| 亚洲男人的天堂av| 精品久久久影院| 色偷偷一区二区三区| 奇米色一区二区| 日韩毛片一二三区| 日韩欧美精品在线视频| 91视视频在线观看入口直接观看www| 午夜精品一区在线观看| 久久精品一区蜜桃臀影院| 在线视频你懂得一区| 国产精品羞羞答答xxdd| 亚洲成人在线免费| 国产精品婷婷午夜在线观看| 91麻豆精品国产| 91一区在线观看| 久久精品国产99久久6| 一区二区三区四区不卡在线| 久久综合国产精品| 欧美日韩国产成人在线91| 丁香婷婷综合网| 日韩电影在线免费观看| 1024成人网| 久久综合久久鬼色| 欧美日韩国产一级片| 成人a级免费电影| 久久se这里有精品| 性感美女极品91精品| 国产精品传媒入口麻豆| 久久这里只有精品首页| 欧美精选午夜久久久乱码6080| 99久久综合色| 国产精品一区二区在线观看不卡 | 美女脱光内衣内裤视频久久影院| 成人欧美一区二区三区| 久久婷婷国产综合精品青草| 欧美精品一二三四| 日本韩国欧美一区| 成人午夜激情片| 麻豆精品视频在线| 偷拍一区二区三区| 亚洲六月丁香色婷婷综合久久| 国产日韩欧美电影| 欧美va亚洲va| 91精品国产91综合久久蜜臀| 91搞黄在线观看| 成av人片一区二区| 国产91综合网| 国产一区欧美二区| 免费观看一级欧美片| 亚洲sss视频在线视频| 亚洲黄色在线视频| 中文字幕人成不卡一区| 中文字幕精品一区二区三区精品| 精品国产一区a| 日韩一本二本av| 在线电影国产精品| 欧美日韩国产精品成人| 欧美日韩一区二区三区视频| 色偷偷久久人人79超碰人人澡| 丁香啪啪综合成人亚洲小说| 国产黄色成人av| 国产精品一级片在线观看| 久久爱www久久做| 久久国产精品99精品国产| 日本中文字幕一区二区视频| 亚洲成人先锋电影| 性做久久久久久久免费看| 亚洲国产aⅴ天堂久久| 亚洲一级电影视频| 亚洲最大成人网4388xx| 亚洲精品v日韩精品| 亚洲在线观看免费| 亚洲在线观看免费视频| 亚洲综合色噜噜狠狠| 亚洲综合999| 亚洲综合区在线| 洋洋成人永久网站入口| 亚洲一区欧美一区| 午夜私人影院久久久久| 五月婷婷久久综合| 男女男精品网站| 久久99精品视频| 国产成人午夜99999| 成人少妇影院yyyy| 91丨porny丨蝌蚪视频| 91精彩视频在线观看| 欧美午夜精品久久久久久孕妇 | 亚洲国产精品t66y| 中文字幕精品三区| 亚洲三级电影网站| 亚洲一区二区在线免费观看视频| 亚洲国产精品视频| 视频在线观看一区| 久久99精品一区二区三区| 国产精品亚洲人在线观看| 成人深夜视频在线观看| 色综合天天综合色综合av| 欧美午夜电影网| 日韩午夜在线影院| 久久九九99视频| 亚洲免费在线视频一区 二区| 亚洲一区二区三区四区在线观看 | 久久国产精品区| 国产91丝袜在线18| 日本电影欧美片| 欧美一级免费大片| 久久丝袜美腿综合| 亚洲人成小说网站色在线| 日韩专区欧美专区| 国产一区二区免费看| 91色乱码一区二区三区| 欧美日韩另类一区| 久久久久久久综合狠狠综合| 亚洲欧美日韩在线播放| 日韩不卡一二三区| 国产成a人亚洲| 欧美日韩在线播| 亚洲精品一区二区三区99| 18成人在线观看| 热久久久久久久| 成人黄色电影在线 | 99国产精品久久久| 欧美日韩精品欧美日韩精品一综合| 欧美一区二区视频观看视频| 日本一区二区视频在线| 亚洲一区日韩精品中文字幕| 国内成人精品2018免费看| 91丝袜美腿高跟国产极品老师 | 亚洲欧美日韩一区| 日本美女一区二区三区| 风间由美一区二区三区在线观看 | 日韩在线卡一卡二| 国产成人免费视频网站高清观看视频| 色偷偷久久人人79超碰人人澡 | 亚洲永久精品国产| 国内精品国产三级国产a久久| 色综合天天综合给合国产| 欧美一区二区三区爱爱| 中文字幕一区二区在线播放| 日本不卡一二三| 91蜜桃在线免费视频| 日韩视频不卡中文| 亚洲精品国产视频| 国产精品自拍在线| 欧美日韩不卡视频| 国产精品区一区二区三区| 日韩精品久久理论片| 99久久久久久| 亚洲精品一区二区精华| 午夜精品久久久| 成人av手机在线观看| 日韩精品一区二区三区在线观看 | 顶级嫩模精品视频在线看| 欧美日韩国产高清一区| 中文字幕亚洲区| 国产原创一区二区| 欧美日韩美少妇| 亚洲视频免费看| 国产精品18久久久久久久久久久久| 欧美日韩激情一区二区三区| 欧美极品aⅴ影院| 麻豆精品在线看| 欧美日韩一区视频| 亚洲男人天堂av| 成人毛片在线观看| 久久蜜臀中文字幕| 日韩中文字幕1| 欧美性受极品xxxx喷水| ㊣最新国产の精品bt伙计久久| 国产在线视频不卡二| 欧美精选一区二区| 一区二区三区蜜桃网| 成人动漫一区二区|