蛋白檢測(cè)試劑盒常用的檢查方法你了解嗎？
點(diǎn)擊次數(shù)：922 更新時(shí)間：2019-01-02
蛋白檢測(cè)試劑盒常用的檢查方法為：以一定濃度的人IgG（一般為10ng/ml）包被ELISA板各孔，洗滌后每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋度的酶標(biāo)抗人IgG抗體，CDH16試劑盒,人KSP鈣黏蛋白檢測(cè)試劑盒保溫后洗滌， 加底物顯色，終止酶反應(yīng)后，分別測(cè)每孔溶液的吸光度。控制反應(yīng)條件，使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。蛋白檢測(cè)試劑盒計(jì)算全部讀數(shù)的平均值。所有單個(gè)讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差，應(yīng)小于10%。
蛋白檢測(cè)試劑盒使用方法:
1. 試劑準(zhǔn)備：將所有試劑(G250 染色液、BSA 溶液、樣品)平衡至室溫。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：取 50 μl BSA 溶液(2 mg/ml)，用溶解蛋白樣品的緩沖液稀釋至 200 μl，終濃度為 0.5 mg/ml。為了簡(jiǎn)便起見(jiàn)，也可以用生理鹽水或 PBS 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)置參考如下。標(biāo)準(zhǔn)品的用量分別為0、1、2、4、8、12、16和20 μl，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20 μl。推薦設(shè)兩個(gè)重復(fù)。
4. 樣品孔中加入20 μl待測(cè)樣品。如樣品濃度過(guò)高，可適當(dāng)稀釋?zhuān)怪湓跇?biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。
5. 每孔加入200 μl G250染色液，室溫放置2 - 5分鐘。
6. 用酶標(biāo)儀測(cè)定OD595，或560 - 610 nm之間的其它波長(zhǎng)的吸光度。
7. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。
蛋白檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):
1、試劑與標(biāo)本量可按生化分析儀器要求恒比例增減。
2、試驗(yàn)值若超過(guò)線性范圍，應(yīng)該對(duì)樣本進(jìn)行稀釋?zhuān)ㄗh根據(jù)使用的具體儀器稀釋樣本。
3、試劑中含有0.05% Proclin-300作保存劑。不要吞入，避免接觸皮膚和粘膜。若不慎導(dǎo)致接觸皮膚或粘膜，應(yīng)立即用
蛋白檢測(cè)試劑盒多用于人或動(dòng)物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量測(cè)定。可通過(guò)比色法分析濃度，在紫外可見(jiàn)光譜中的波長(zhǎng)為540nm。雙縮脲法測(cè)定蛋白濃度兼容性亦很好，不受大部分樣本中其他成分的影響，但易受銅離子螯合劑影響。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。
