CCL-149（大鼠肺泡上皮細胞）說明書

CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)說明書訂購流程：
根據自己需要向我司說明來意;
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下單并包郵送貨上門;

CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)說明書功能：
（1）       血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
（2）       表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應。
（3）       與血管疾病的進展和穩定有關。
 生理變化：
（1）       主動脈硬化。
（2）       主動脈瘤
（3）       主動脈鈣化。
基本特性：
（1）       組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）       鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）       原代細胞培養末期液氮凍存。
（4）       每凍存管細胞數：>5×105 cells/1ml。
（5）       肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。


Hep G2(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

ACHN, 人腎細胞腺細胞

M-FC肉湯/濾膜糞大腸菌肉湯/M-FC Broth大腸桿菌群的濾膜法檢測250克國產/進口

聚山梨酯80培養基(需氧、厭氧菌)/Tween80 Medium(Bacteria)油劑藥品的無菌試驗250克國產/進口

新生牛血清/New born calf serumBR200毫升國產/進口

TE-13(人食管細胞)5×106cells/瓶×2

黑木耳 Auricularia auriculaRD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)

非洲綠猴SV40 轉化的腎細胞人胃細胞

苜蓿中華根瘤菌BC-020(人腺細胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae黑綠木霉

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum雙酶梭菌 Clostridium bifermentans

香菇 Lentinula edodes香菇 Lentinula edodes

大鼠小腸血管內皮細胞*培養基Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細胞)
CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)說明書1 kit (160 reactions)Rapid DNA Dephos & Ligation Kit

1,000 URNA Polymerase, SP6, 1000 u

2 x 1 mlCDP-Star 2 x 1 ml

1 set (30 blots)DIG Wash and Block Buffer Set

500 mlDIG Easy-Hyb

150 U (200 µl)Anti-fluorescein-ap Fab Fragme（ sheep IgG）

50 UAnti-Digoxigenin-POD (poly)

1,000 URNA Polymerase, T7, 1000 U
CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)說明書運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d，繪制細胞生長曲線