NCI-H1975（人肺腺癌細胞）說明書

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NCI-H1975(人肺腺癌細胞)說明書功能：
（1）       血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
（2）       表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應。
（3）       與血管疾病的進展和穩定有關。
 生理變化：
（1）       主動脈硬化。
（2）       主動脈瘤
（3）       主動脈鈣化。
基本特性：
（1）       組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）       鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）       原代細胞培養末期液氮凍存。
（4）       每凍存管細胞數：>5×105 cells/1ml。
（5）       肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

3
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae泡盛曲霉 Aspergillus awamori

人腦微血管內皮細胞褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum

棒桿菌 Corynebacterium sp.異常漢遜酵母 Hansenula anomala

人腺成纖維細胞*培養基枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

雅致放射毛霉 Actinomucor elegans葡萄牙棒孢酵母 Clavispora lusitaniae

大鼠角膜內皮細胞*培養基小鼠結腸平滑肌細胞*培養基

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人關節軟骨細胞*培養基小鼠胎兒表皮角質形成層細胞*培養基

牛舌菌、肝色牛排菌 Fistulina hepatica釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人腦動脈血管內皮細胞*培養基100mL

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

刺毛鼠肺成纖維樣細胞英文名稱：

解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica
NCI-H1975(人肺腺癌細胞)說明書0.156-10 ng/mL人內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Endothelin-1

0.312-20 ng/mL人早期生長反應因子1(Egr-1)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Early growth response protein 1

78-5000 pg/mL人紅細胞膜蛋白質帶4.2(EPB42)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mLELISA Kit for Human Erythrocyte membrane protein band 4.2

0.312-20 ng/mL人EPH受體A4(EPH4)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Ephrin type-A receptor 4
NCI-H1975(人肺腺癌細胞)說明書運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d，繪制細胞生長曲線