產品簡介：
產品名稱：游離膽固醇(FC)含量試劑盒科研
規格：48樣 96樣
貨號：AS350
檢測方法：可見分光光度法 微板法
產品分類：脂肪酸系列
貯存溫度：2～8℃。
本試劑盒保質期：6個月。本產品僅用于科研實驗。
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本：
取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。
【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本：
先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；
12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10
4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。
IQGAP1 支架抗體 規格: 0.2ml
phospho-DDX58 (Ser8) 磷化DDX58抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗羊IgG 規格: 0.1ml
Rabbit anti-human IgM whole serum 兔抗人IgM抗清 規格: 1ml
Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgG 規格: 0.1ml
IL-3 白介3抗體 規格: 0.2ml
SIRT1 沉默調節1抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc 兔抗小鼠IgG-Fc 規格: 1mgC21orf55/DnaJC28 21號染色體開放閱讀框55抗體 規格: 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.1ml
CAB39L 鈣結合樣39抗體 規格: 0.2ml
ANKRD26 錨重復結構域26抗體 規格: 0.2mlPLC β2/Phospholipase C beta 2 磷酯Cβ2抗體 規格: 0.2ml
游離膽固醇(FC)含量試劑盒科研83905-01-5阿奇 規格： HPLC≥98%;100mg
氨甲環 規格： 100mg
5940-00-1薟精;Darutigel 規格： 20mg
516-35-8牛磺 規格： 20mg
扎丁 規格： 100mg
143390-89-0菌酯;純品型;標準品;有證書 規格： 0.1g
107668-79-1草烏甲 規格： HPLC≥98%，20mg/vial
夏天無 規格： 1g
700-57-22-金剛烷 規格： HPLC≥98%;20mg
70458-96-7諾星;純品型;標準品;有證書 規格： 0.1g
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。
